Расшифровка анализа на вирус Эпштейна-Барра, инфекционный мононуклеоз

Общая характеристика патогенеза и антигенов ВЭБ

Вирус Эпштейна-Барр относится к 4 типу патогенов из семейства герпесвирусов, проявляет сродство к лимфоцитам, обладает онкогенными и иммунодепрессивными свойствами.

Структура Epstein-Barr virus сложная, поэтому при диагностике применяют несколько анализов для верификации ВЭБ в организме. Кроме того, исходя из выявленных показателей, удается определить давность инфицирования и форму инфекции.

Структура вириона представлена следующими, диагностически важными, белками:

  • VСА – наружный или капсидный антиген;
  • ЕВNА – внутренний или ядерный антиген;
  • МА – антиген мембраны;
  • ЕА – ранние (диффузный ЕАD и локализованный ЕАR).

В-клетки одними из первых принимают удар, а далее, вирус распространяется по остальной лимфатической системе.

Первое заражение вирусом сопровождается поражением 30% В-лимфоцитов. ДНК вируса Эпштейна-Барр поступает в клеточное ядро, при этом лимфоциты становятся «бессмертными»: несмотря на инфицирование, они непрерывно размножаются, что определяется присутствием атипичных мононуклеаров.

В период бессимптомного течения ВЭБ-инфекции вирион, персистирующий в лимфоцитах, экспрессирует ядерные и мембранные белки, что означает возникновение антител к указанным антигенам.

Ядерный антиген вируса Эпштейна-Барр провоцирует недоступность зараженных В-клеток для уничтожения иммунокомпетентными клетками.

В результате пораженные лимфоциты продолжают размножаться. Пролиферация их становится вирусзависимой.

В ответ на поражение В-лимфоцитов начинает активизироваться клеточное звено иммунитета, а именно Т-лимфоциты. Они тормозят избыточное размножение пораженных клеток, поэтому в анализах крови определяется лимфоцитоз, не только атипичные мононуклеары.

Цитотоксические иммунные клетки и киллеры (NK) сдерживают пул зараженных В-лимфоцитов, ограничивая патологический процесс, однако, погрешности иммунитета приводят к недостаточной атаке и постепенной пролиферации инфицированных человеческих клеток.

Поэтому при терапии инфекционного мононуклеоза и различных состояний, обусловленных ВЭБ-инфекцией, предпочтительно выполнить иммунограмму.

Во рту инфицированные клетки длительно локализуются в миндалинах, обуславливая выделение вирусных частиц с выдыхаемым воздухом, кашлем. ВЭБ покидает разрушенные В-лимфоциты для поражения новых.

Но описывают и иной тип паразитирования вируса Эпштейна-Барр в клеточных элементах – скрытый, когда образуется малое количество копий вируса, поддерживая тем самым носительство.

Вирус инфицирует не только В-клетки, но и ряд других клеток, несущих иммунную функцию, эпителиоциты сосудов. ДНК вируса в ядре может существовать в двух формах: кольцевая структура (эписома) или встроенная в геном.

Последняя приводит к хромосомным нарушениям, что лежит в основе онкологических заболеваний, ассоциированных с вирусом Эпштейна-Барр.

Показатели крови к вирусу герпеса 4 типа расшифровываются следующим образом:

  1. Ранний антиген вириона обеспечивает выработку антител в начале заражения или при обострении.
  2. Капсидный антиген вируса Эпштейна-Барр характеризуется продукцией иммуноглобулинов в острой фазе начала патологии, при реактивации процесса. Особенностью считается наличие иммуноглобулинов к капсидному белку VCA как при обострении хронической инфекции, так и при ремиссии.
  3. Антитела к ядерному белку вируса определяются при любой разновидности формы хронической патологии. После выздоровления от острой формы их наличие означает циркуляцию антител памяти: инфекция протекала ранее.
  4. Антитела к мембранному антигену циркулируют при скрытом течении ВЭБ-инфекции.

Образуют структуру вириона капсидный, ядерный и мембранный антигены – они считаются уникальными или вирусоспецифическими.

Показания к обследованию на ВЭБ

При заражении вирус Эпштейна-Барр (он же гаммагерпесвирус IV типа), в первую очередь атакует защитную систему организма. Он проникает в В-лимфоциты и искажает иммунный ответ, что провоцирует неадекватную реакцию на инфекции и собственные клетки человека.

Необходимо подтвердить или исключить влияние ВЭБ-инфекции, если:

  • по совокупности внешних симптомов и показателям крови у больного можно предположить инфекционный мононуклеоз;
  • очень часто возникают ОРВИ и ОРЗ, иммунитет заметно снижен;
  • у ребенка или взрослого часто диагностируется ангина (3-4 раза в год и чаще);
  • простудные заболевания сопровождаются увеличением лимфатических узлов на шее, налетом в горле, высокой температурой (выше 38-39 градусов);
  • у ребенка наблюдается одновременное увеличение миндалин, лимфоузлов и аденоидов (на фоне частых простуд);

Вирус Эпштейна-Барр (ВЭБ): пути передачи, заражение, прогноз (последствия и осложнения)

Ранний антиген

Вскоре после поражения В-клеток в крови начинает формироваться пул иммуноглобулинов к раннему антигену. Когда уровень иммуноглобулинов достигает порогового уровня, их можно зафиксировать лабораторным методом.

Ранний антиген вируса Эпштейна-Барр не является структурным, он необходим для размножения вириона, к нему продуцируются антитела класса IgM и IgG.

Предлагаем ознакомиться:  Герпетические инфекции вызывающие заболевания у детей

Антитела IgM к раннему белку ВЭБ довольно рано формируются и так же быстро исчезают, поэтому выявить их зачастую не удается.

Это объясняется довольно длительным инкубационным сроком инфекционного мононуклеоза. Пока ВЭБ размножается в В-лимфоцитах в инкубации, симптомов не наблюдается.

Антитела IgG к раннему антигену начинают свою выработку уже при начавшейся симптоматике – в фазу разгара.

Таким образом, идентификация иммуноглобулинов к белку раннего типа является тестом ранней диагностики. При этом длительное сохранение антител IgG к ЕА говорит о хронизации, а рост считается маркером обострения.

Строение вируса и иммунный ответ

Серологическое исследование, популярное для диагностики вируса Эпштейна-Барр, основывается на анализе иммунного ответа организма на проникновение возбудителя. Защитная реакция человеческого иммунитета – это выработка антител для нейтрализации обнаруженного антигена. Немного терминологии для лучшего понимания:

  1. Антиген – это белковая молекула (иногда – полисахарид или нуклеиновая кислота), которую иммунная система воспринимает как чужеродную и стремится уничтожить. Это могут быть бактерии, вирусы и их фрагменты, пыльца растений, некоторые продукты и другие протеиновые соединения. При сбоях в работе иммунитета собственные белки организма могут восприниматься как антигены.
  2. Антитело – особый белок (иммуноглобулин), вырабатываемый лимфоцитами для связывания и блокирования антигена. К каждому виду антигена вырабатываются специфические защитные белки.

Возбудитель инфекции Эпштейна-Барр структурно представляет собой двухцепочечную молекулу ДНК (ядро, или нуклеар), окруженную оболочкой-капсидом, и покрытую внешней мембраной, включающей гликопротеиды для закрепления на слизистой. Эти элементы являются антигенами для иммунной системы человека:

  • нуклеарный (ядерный) антиген (EBNA) вируса Эпштейна-Барр;
  • капсидный (VCA) – белковая оболочка ядра;
  • мембранный (MA) – наружная мембрана;
  • ранний (EA) — гликопротеиды во внешней оболочке вируса.

К каждому из них В-лимфоциты человеческого организма вырабатывают несколько типов иммуноглобулинов, отличающихся по времени появления, структуре и назначению.

Как вирусы герпеса взаимодействуют с организмом человека

Капсидный антиген

Антитела к VCA Ig определяются методом хемолюминесцентного иммунного анализа. Для интерпретации анализа опираются на величину 20,0 Ед/мл. Если определяется количество антител меньше, чем это число, то результат отрицательный, равное или большее количество — положительный.

Если количество антител не определяется или указывает на отрицательный результат, то это не всегда отсутствие контакта с вирусом, в некоторых случаях такой результат говорит об острой фазе болезни. Чтобы исключить подозрения, через 10—14 нужно повторить анализ и дополнительно сдать на IgM.

Антитела к капсидному антигену вируса Эпштейна-Барр IgM начинают формироваться по окончании инкубации (в начале патологии) и к моменту разгара клиники имеют значения, определяемые лабораторно.

Если иммуноглобулины М на капсидную форму белка вируса Эпштейна-Барр положительные на протяжении больше 12 недель, подозревают затяжной мононуклеоз и иммунодефицит.

Таким образом, положительный результат анализа крови на IgM к капсидному антигену подтверждает острую инфекцию. IgG положительный на первом месяце болезни, а пик достигается на 8 неделе от момента развития клиники.

При отсутствии признаков положительный IgG на капсидный антиген к вирусу Эпштейна-Барр подтверждают, что инфекция перенесена. Эти иммуноглобулины называют клетками памяти.

Если анализ выполняют в течение всей инфекции и определяют постепенное нарастание значения антител IgG, то выставляют острую инфекцию первичного характера.

Если в крови пациента длительно присутствуют IgG к VCA и к ЕА, возрастает вероятность хронизации. Очень высокие уровни IgG к VCA могут указывать на  лимфому Беркитта и рак назофарингеальной области.

Исследование на антитела к вирусу Эпштейна-Барр

Цель серологической диагностики — выявление в крови антител к инфекционным возбудителям. К ней относятся следующие методы исследования:

  1. РИФ – реакция иммунофлюоресценции.
  2. ИФА – иммуноферментный анализ.
  3. ИХЛА – иммунохемилюминесцентный анализ.

Самым распространенным из них является метод ИФА, который применяется в большинстве российских медучреждений. С его помощью выявляют присутствие различных герпесвирусов, токсоплазмоза, гепатитов, кори и краснухи, а также других инфекционных заболеваний. Преимущества такого способа исследования очевидны:

  1. Очень высокая специфичность и чувствительность. Метод позволяет обнаружить искомое соединение даже в том случае, если его концентрация крайне мала.
  2. Низкая вероятность ошибки, человеческий фактор малозначим при этом исследовании. Это свойство обусловлено высокой технологичностью используемых реагентов и тест-систем.
  3. Возможность диагностировать заражение на самой ранней стадии, еще до появления клинических симптомов.

Однако есть и минусы, которые нужно иметь в виду:

  • высокая стоимость исследования;
  • узкая специфичность – назначая исследование, врач должен с большой долей вероятности предполагать, какая инфекция провоцирует заболевание;
  • позволяет обнаружить в крови антитела, но не самого возбудителя.
Предлагаем ознакомиться:  Научная электронная библиотека

Обычно исследование направлено на выявление следующих типов антител к вирусу Эпштейна-Барр:

  1. IgM (VCA) — иммуноглобулин класса М к капсидному антигену. Они вырабатываются с первых дней заражения и примерно 6 месяцев после инфицирования, а так же в период рецидива вирусной активности.
  2. IgG (VCA) – иммуноглобулин класса G к капсидному антигену. Начинают вырабатываться организмом спустя примерно 20 дней после инфицирования, и затем обнаруживаются в крови на протяжении всей жизни.
  3. IgG (EA) — антитела класса G к раннему антигену. Как правило, вырабатываются в течение примерно полугода с момента заражения, затем исчезают. При латентной форме инфекции Эпштейна-Барр не определяются.
  4. IgG (EBNA) – поздние иммуноглобулины к нуклеарному (ядерному) антигену вируса Эпштейна-Барр. Они указывают на наличие устойчивого иммунитета к возбудителю, начинают формироваться после исчезновения внешних симптомов, примерно через полгода после заражения. Если их титр повышен у ребенка или взрослого, это может говорить о рецидиве инфекции.

Диагностика вируса Эпштейна-Барр (ВЭБ): анализ крови, ДНК, ПЦР, печеночные пробы

Анализ на антитела к ядерному антигену

Анализ выполняют в срок до 5 дней. Используется также хемолюминесцентный анализ. Результаты интерпретируют в зависимости от полученных чисел:

  • менее 5 Ед/мл — отрицательный результат;
  • от 5 до 20 Ед/мл — сомнительный результат;
  • более 20 Ед/мл — положительный результат.

Большие концентрации IgG против вируса Эпштейна-Барр говорят о положительном результате и об острой инфекции. Отрицательный результат при аналогичных иммуноглобулинах M и G говорит об отсутствии болезни.

Увеличение IgG к ядерным антителам в фазу острой инфекции — показатель выздоровления. Концентрация иммуноглобулинов 5—20 Ед/мл говорит о том, что, скорее всего, контакт с возбудителем был в прошлом. Повторное исследование проводят через 2 недели.

Антитела к ядерному антигену EBNA начинают продуцироваться после патологии в период реконвалесценции. Определению в большинстве подлежат иммуноглобулины IgG.

Антитела к EBNA могут фиксироваться несколько лет после острого мононуклеоза. Возрастает их количество на третьем-двенадцатом месяце от момента начала болезни.

Следует знать, что отсутствие этих иммуноглобулинов при параллельной циркуляции антител IgM к VCA, а также антител IgG к ЕА, указывает на текущий инфекционный мононуклеоз.

Если ранее результат на EBNA был негативный, а затем стал положительный – предполагают существующую инфекцию.

При наличии клиники мононуклеоза или другой ВЭБ-патологии изредка отсутствие данных иммуноглобулинов к Эпштейна-Барр указывает на выраженный иммунодефицит.

Обнаружение в крови антител к EBNA классов IgM при негативных IgG показывает на острое инфицирование. Если соотношение обратное, то процесс считается перенесенным ранее.

Правила сдачи анализа

Чтобы результат исследований был максимально достоверным, перед сдачей крови нужно выполнить ряд условий:

  1. Полсуток не принимать никаких лекарств. Если это невозможно, то сотрудников лаборатории нужно предупредить о принятых препаратах.
  2. Также в течение 12 часов до сдачи крови на инфекцию Эпштейна-Барр нельзя употреблять алкоголь, курить.
  3. Физические нагрузки необходимо ограничить.
  4. Кровь сдается строго натощак! (полсуток до анализа нельзя принимать пищу). Поэтому забор крови для исследования проводят обычно рано утром.
  5. Детей дошкольного возраста нужно поить перед сдачей анализа теплой кипяченой водой (понемногу, на протяжении получаса перед забором материала).

Нарушение этих правил может привести к искажению результатов: тогда потребуется повторная сдача крови, либо может быть назначено неверное лечение.

Обнаружение ДНК

С целью непосредственного обнаружения вирусной ДНК в биоматериале больного применяют ПЦР. Благодаря этому способу удается выявить вирус в следующих образцах и:

  • в слюне;
  • в цервикальном канале;
  • в секрете предстательной железы;
  • в моче;
  • в соскобе из уретры.

С помощью ПЦР удается обнаружить не менее 80 вирионов в 5 мкл биологической жидкости. Специфичность теста приближается к 100%.

Результат возможно расценить двояко. Положительный ПЦР в слюне на вирус Эпштейна-Барр свидетельствует о носительстве или заболевании. Если присутствует характерная клиника и результат ПЦР положительный, диагноз подтверждается.

ДНК Эпштейна-Барр удается зафиксировать в начале заболевания. Спонтанное выделение возбудителя при исключении наличия клиники указывает на носительство.

В слюне ДНК определяют в конце инкубации, в фазе разгара и в течение полугода после выздоровления.

ВЭБ могут определять качественно и количественно при лечении хронической формы, при иммунодефиците на фоне Эпштейна-Барр, при терапии опухолей, связанных с вирусом.

Определение DNA EBV (Эпштейн-Барр вируса) в количественном выражении необходимо для анализа эффективности лечения, так как количественная ПЦР позволяет выявить вирусную нагрузку.

Если со временем при терапии число копий снижается, тактика выбрана верно. В норме копий вируса в биоматериале быть не должно.

Предлагаем ознакомиться:  Появление фурункулов в интимной зоне у мужчин и женщин как лечить инфекцию

Диагностика ВЭБ-инфекции имеет большое значение при планировании беременности, у часто болеющих детей и взрослых, пожилых людей.

С целью выбора адекватной тактики лечения, идентифицируют антитела к белкам Эпштейна-Барр, а также определяют ДНК с помощью ПЦР. Анализы помогают выявить давность заражения и форму инфекции.

Расшифровка анализа

Несомненным «плюсом» при диагностике ВЭБ-инфекции является доступность методов исследования, первенство среди которых занимает общий анализ крови.

СОЭ Скорость оседания эритроцитов значительно повышается при прогрессировании вируса Эпштейна-Барра, так как иммунная система активно старается его ликвидировать.
Гемоглобин Может оставаться как в норме, так и снизится до 85-90 г/л
Эритроциты Редко реагируют на инфекционный мононуклеоз.
Лейкоциты Так как острая фаза заболевания сопровождается активизацией воспалительного процесса, то и количество лейкоцитов при этом стремительно повышается.
Лимфоциты Незначительно возрастают еще во время инкубационного периода. Чаще всего такие показатели сохраняются на протяжении всего периода протекания болезни.

Самым же главным признаком инфекционного мононуклеоза являются атипичные мононуклеары, которые и свидетельствуют о наличии в организме ВЭБ- инфекции.

Интерпретация анализов на антитела к вирусу Эпштейна-Барр, особенно количественных, не универсальна. Показатели нормы могут различаться в зависимости от вида используемых реагентов и метода исследования.

антитела IgM к капсидному антигену вируса Эпштейна-Барр могут обозначаться в бланке анализа так: ат VCA IgM, anti-VCA IgM, ВЭБ VCA IgM, анти-VCA IgM. Если иммуноглобулины класса М к капсидному белку обнаружены, это говорит об активном статусе вирусной инфекции.

Отрицательный результат указывает на отсутствие вируса либо на латентную (скрытую) инфекцию. Антитела IgG к капсидному антигену зашифрованы в результатах в виде: EBV VCA IgG, ат VCA IgG. Появляются также в начале острой фазы заболевания, в течение первого месяца после инфицирования.

Серология, ИФА, ПЦР при вирусе Эпштейна-Барр. Положительный и отрицательный результат

Отрицательный IgG значит, что либо человек никогда не был заражен ВЭБ-инфекцией, либо она находится в стадии ремиссии:

  1. Антитела IgG к ядерному (нуклеарному) антигену возбудителя Эпштейна-Барр появляются на поздней стадии заболевания. В острой фазе болезни обычно отсутствуют, начинают формироваться спустя примерно 3-6 месяцев после заражения и обнаруживаются в крови в течение многих лет. Анти-EBNA IgG положительный говорит о перенесенной в прошлом инфекции Эпштейна-Барр и наличии иммунитета к ней. Если значение отрицательно – можно предположить начальную стадию заболевания либо отсутствие возбудителя в организме.
  2. Антитела класса G к раннему антигену — вырабатываются при первичном инфицировании, в острой фазе заболевания. При выздоровлении быстро исчезают. Такой анализ применяется для ранней диагностики вирусной инфекции Эпштейна-Барр. Высокие титры ЕА IgG обнаруживают при иммунодефицитных состояниях, ВЭБ-ассоциированных онкологических заболеваниях, хроническом инфекционном процессе.

Возможные комбинации иммуноглобулинов к вирусу Эпштейна-Барр трактуются следующим образом:

  1. EBNA IgG- VCA IgG- VCA IgM : ранняя стадия болезни, первичное инфицирование.
  2. EBNA IgG- VCA IgG VCA IgM : первичное инфицирование, острая стадия болезни.
  3. EBNA IgG VCA IgG VCA IgM : активный инфекционный процесс, первичное заражение либо рецидив.
  4. EBNA IgG- VCA IgG- VCA IgM-: заражения не было (отсутствие вируса), либо есть выраженный иммунодефицит.
  5. EBNA IgG VCA IgG VCA IgM-: латентная (скрытая) инфекция, пациент является носителем вируса.
  6. Если обнаружены только антитела G к ядерному антигену – это тоже говорит о давно перенесенном заболевании и наличии «спящего» ВЭБ в организме.

Общая клиническая картина складывается из соотношения в анализе иммуноглобулинов IgM и IgG. Серологические исследования не всегда дают абсолютно точный результат, к тому же инфекция Эпштейна-Барр может развиваться в атипичной форме (при этом ряд антител отсутствует). Поэтому врач может назначить дополнительные обследования.

Госпитализация при вирусе Эпштейна-Барр. Гормоны, антибиотики и пробиотики при ВЭБ

Авидность антител

В ряде случаев для уточнения диагноза может потребоваться анализ на авидность антител к вирусу Эпштейна-Барр. Индекс авидности определяет прочность связи между антигеном и защитным белком. При первичном заражении он достаточно низкий, но в ходе «борьбы» между иммунной системой и вирусом постепенно растет.

Вирус Эпштейна-Барр широко распространен среди населения всего мира, поэтому наличие антител к нему не является чем-то исключительным и редким. Однако в случае низкого иммунитета, часто рецидивирующих заболеваний, синдрома хронической усталости — своевременное выявление причины очень важно.

Лечение вируса Эпштейна-Барр (ВЭБ) у детей и взрослых. Длительность и схема лечения при ВЭБ

Ссылка на основную публикацию

Adblock detector